по соседству с мицелием, будут ограждены от губительного воздействия перекиси. Таким образом, в общем случае, перекись лишь защищает питательную среду или субстрат от аэробного заражения. Необходимость самой аккуратной работы остается актуальной для процесса переноса мицелия или для любой другой операции, подразумевающей нахождение мицелия в нефильтрованной атмосфере. Поэтому, если заражение мицелия все-таки произошло, вам придется начать все заново с чистой, незараженной культуры или каким-либо образом очистить мицелий от контаминантов. Мы рассмотрим этот вопрос позже.
Напоследок отмечу, что перекись не является стерилизующим агентом, за исключением столь высоких концентраций, когда его использование уже не совместимо с ростом грибов. Таким образом, вы, в общем случае, не можете использовать перекись, как таковую, для стерилизации питательной среды или субстратов. В концентрациях же, совместимых с ростом грибов, перекись водорода не будет уничтожать живые формы плесневых контаминантов, находящихся в среде и подвергнется быстрому разложению под воздействием ферментов, содержащихся в нестерильных органических материалах. Хотя некоторые споры бактерий и будут убиты перекисью после ее добавления в нестерильную среду, гораздо большее число контаминатнов без труда выживет и через непродолжительное время начнет свой рост. В этой связи следует запомнить: материалы среды и контейнеры должны быть пастеризованы перед добавлением перекиси или заполнением перекисесодержащими средами; питательные среды, которые содержат сырые, не подвергавшиеся обработке органические вещества, должны быть стерилизованы под давлением для того, чтобы разрушить ферменты, разлагающие перекись. И последнее: вода, не подвергнутая стерилизации под давлением, при использовании в составе среды с перекисью должна быть чистой и не должна содержать видимых частиц. Любые частицы органической и даже неорганической природы, вносимые с водой в среду, могут содержать живые микроорганизмы и/или разлагающие перекись катализаторы, которые не обязательно будут уничтожены во время пастеризации.
Безопасность применения перекиси водорода и влияние на окружающую среду
При использовании 3 % перекиси водорода не требуется соблюдения каких-либо особых мер предосторожности. Токсичность перекиси в такой концентрации весьма низка и он полностью разлагается на воду и кислород при разливании или попадании внутрь. 3 % перекись не обладает запахом, не оставляет пятен и не вызывает ожогов. При температуре ниже 60 °C (температура очень горячей воды из-под крана) она даже не действует как отбеливатель. Все свидетельствует о том, что такая перекись не опасна для окружающей среды.
В связи с тем, что промышленная перекись изготавливается химическим путем, а не извлекается, скажем, из натуральных источников, он, скорее всего, не может рассматриваться как экологически чистая субстанция, отвечающая требованиям новомодных сертификационных стандартов. Тем не менее, я считаю, что использование перекиси вполне соответствует духу экологически чистого культивирования. Поскольку перекись, добавленная к грибной культуре, полностью разлагается на воду и кислород по мере того, как грибной мицелий захватывает субстрат, после снятия урожая в грибах от перекиси не останется и следа. Разложение перекиси происходит по причине вполне естественных процессов метаболизма. Более того, перекись водорода сама по себе может быть обнаружена во всех аэробных организмах и во многих натуральных средах. С незапамятных времен пчелы выделяют ферменты, добавляющие перекись в нектар, защищая его от бактерий, грибков и плесени, чем и обусловлены антибактериальные свойства меда. Мицелий по крайней мере некоторых видов грибов производит собственную перекись, которая помогает разрушать древесные субстраты, встречающиеся на пути этих грибов. Даже в человеческом организме перекись является частью защитных механизмов, способствующих выздоровлению. Более того, тысячи приверженцев перекисной системы оздоровления по всему свету принимают внутрь перекись во время еды и называют это перекисной терапией. Считается, что ежедневный прием перекиси приводит к оздоровлению при различных заболеваниях и усиливает жизненные силы организма, а некоторые люди принимают перекись годами (хотя лично я бы не рекомендовал подобных методик…). Наконец, применение перекиси избавляет от использования ресурсоемкого оборудования, оснастки и сопутствующих приспособлений, упрощая каждый этап процесса культивирования грибов.
Есть один вопрос, относящийся к воздействию перекиси на грибной субстрат в качестве оксиданта. Хлор, когда он реагирует с органическими материалами типа бумажной пульпы, производит небольшие количества диоксина, очень опасного канцерогенного вещества. Перекись не производит диоксина и, вследствие этого,
борцы за экологию призывают производителей бумаги отбеливать бумажные волокна перекисью, а не хлором. Опять же, нельзя полностью исключать того, что перекись может вызывать образование других опасных веществ, когда она реагирует с органическими материалами в грибных субстратах, хотя я считаю это весьма маловероятным. Например, аэробные организмы прошли через миллионы лет эволюции, окруженные перекисью и имея ее внутри себя. Перекись образуется в процессе нормального аэробного метаболизма и формируется в естественных условиях при реакции воды с кислородом под воздействием солнечного ультрафиолета. Это означает, что аэробные организмы, скорее всего, приобрели метаболический механизм, позволяющий безопасно иметь дело с различными продуктами окисления, которые образуются в результате реакции перекиси с биологическим материалом. Кроме того, перекись водорода в стерилизованных грибных субстратах ведет себя химически стабильно, а концентрация перекиси, которую мы будем использовать, так низка, что реакции окисления в субстрате должны быть весьма незначительными. Наконец, я ни разу не наблюдал мутагенного или токсического влияния субстрата, обработанного перекисью, на мицелий или плодовые тела грибов. Агаровые среды, содержащие перекись водорода, дают превосходные, здоровые ореолы мицелия, а конечные плодоносящие культуры производят такие же замечательные грибы, как и при использовании традиционных методов культивирования.
Стабильность
3% раствор перекиси, имеющийся в продаже в супермаркетах и аптеках, содержит стабилизатор на основе фосфорной кислоты и достаточно хорошо сохраняется в прохладном месте. После добавления перекиси водорода к стерилизованной и охлажденной среде, перекись, очевидно, разлагается с невысокой скоростью. Точное значение времени, в течение которого перекись сохранит свои свойства, вероятно, определяется сложной зависимостью, включающей состав среды, концентрацию перекиси и температуру. Тем не менее, мой опыт показывает, что перекись обеспечивает защиту от заражений в течение достаточно длительного времени, чтобы различные виды грибов успели безопасно колонизировать субстрат.
С другой стороны, перекись водорода не следует добавлять в горячую среду, если только вы не собираетесь скомпенсировать потерю перекиси при разложении, добавляя большее его количество. В связи с тем, что перекись приобретает свойства отбеливателя при температуре выше 60 °C, она будет легко разлагаться при контакте с комплексными органическими материалами при температурах от 60 °C и выше. Таким образом, перед добавлением перекись вам придется подождать, пока среда остынет — если не до комнатной температуры, то хотя бы до такой, которую терпит рука.
В противовес своему поведению в чистом растворе или стерилизованной среде, перекись быстро разлагается в присутствии перекисеразрушающих ферментов, как это случается при промывании раствором перекиси ран. Разрушенные клетки кожи и кровеносных сосудов, находящиеся в ране, в изобилии содержат перекисеразрушающие ферменты, что вызывает быстрый
