пищевых пластиковых емкостях. Вероятно вы столкнетесь с проблемой быстрого высыхания картонных дисков. Для решения этой проблемы добавьте небольшое количество перекиси в контейнер с чашками. Поставьте чашки на небольшую платформу, для того что бы перекись не заливала чашки.
Пересев.
Вероятно, вы задаетесь вопросом, каким же образом совершить пересев с картонного диска?
Метод пересева прост — стерильным скальпелем поскребите поверхность влажного картонного диска с мицелием, это позволит соскоблить колонию гриба с частичками картона и перенести на другую чашку.
Рифленый картон слишком жесток для легкого удаления мицелия с поверхности.
Очистка мицелия.
Я уже объяснял в первом томе, что скрытые контаминанты могут расти на поверхности мицелия, росшего на перекисной среде, поскольку перекись на поверхности мицелия отсутствует. Периодически грибные культуры должны очищаться от скрытых инфекций, иначе они могут присутствовать в грибных плодах, и попасть в споровый материал.
Мицелий, выращенный на картонных дисках, не является исключением.
С агаровыми культурами мы чистили мицелий с помощью довольно неуклюжей процедуры — изъятия агарового диска из основания чашки Петри в крышку, и прививки мицелия на нижнюю сторону агара. После приростания мицелия агаровый диск возвращался на место. Это вынуждало агар прорастать через среду оставляю загрязнители позади. Хотя этот способ неплохо работает, применение его дает большое количество брака из-за большого количества механических операций.
С картоном легко делать прививку в основание диска: вам нужно только перевернуть чашку вверх дном и потрясти ее, чтобы диск отвалился от дна чашки и прилип к крышке. Перенесите образец мицелия на внутреннюю поверхность диска стерильным скальпелем, закройте чашку и, перевернув чашку, щелкните по ней. Диск отклеится от крышки и вернется на место. Но как оказывается, мицелий прорастает сквозь диск очень медленно, предпочитая расти по сторонам. Вместо того, что бы ждать пророста мицелия в центре, мы позволяем мицелию свободно расти под слоем картона. Влияние загрязнений, попадающих с боковой стороны, несущественно. Эта процедура обеспечивает чистоту мицелия, если вы берете материал для пересева с края колонии.
Если у вас не получается остановить распространение инфекции высевом мицелия в центр диска, можете попробовать сделать из двух смоченных дисков «сандвич» и сеять между ними. Несъедобность картона должна затормозить распространение инфекций. Когда вы захотите извлечь мицелий из «сэндвича», нужно вырвать кусочек картона с мицелием из периферии. Поскольку вы не можете наблюдать, как далеко пророс мицелий, вам нужно внимательно следить за временем инкубации. Нужно дать мицелию достаточно времени для прорастания.
Хранение культур без агара.
Недавно засеянные картонные диски могут быть извлечены стерильным пинцетом и сохранены в стерильном ziplock [65]-e. После перенесения, дайте мицелию вырасти в течение недели или двух. В качестве альтернативы — узкие стерилизованные увлажненные полоски картона можно привить маленьким кусочком агаровой культуры, затем, с помощью стерильного пинцета, поместить в пробирку для хранения. Когда придет время восстанавливать культуру из хранения, данная полоска может быть помещена в чашку Петри со средой для культивации. Еще один способ состоит в увлажнении и стерилизации небольших бумажных гранул в пробирке в течение 10 минут, и прививки небольшим количеством агаровой культуры. После того как мицелий вырастет, культура может быть сохранена в течение длительного периода.
Я еще не проверял, как долго такие культуры способны сохранятся, но подозреваю, что дольше, чем агаровые, так как влажная бумага и картон, больше походят на природные условия существования грибов. Если вы не будете добавлять никакого дополнительного питания, то среда будет скудной, что обычно и рекомендуется для длительного хранения.
Пересылка культур по почте.
Культуры, посеянные на бумаге или картоне, могут быть легко отосланы по почте. Сделайте бутерброд мицелия между двух картонных дисков, поместите его в ziplock и прорастите несколько дней. Поместите его в пакет или книгу.
Такой метод отправки мицелия вероятно ограничен разновидностями грибов способными переносить низкие температуры, действию которых мицелий может подвергнутся, путешествуя в багажном отделении самолета. Теплолюбивый мицелий грибов, таких как Миндальный гриб (Agaricus subrufescens), должен быть дополнительно защищен в теплоизолирующем контейнере.
Подготовка субстрата
Субстрат — «восьми минутка»
В «Выращивании грибов простым способом» я описал процедуру для подготовки субстрата в стеклянных банках или контейнерах. Это мой любимый метод подготовки субстрата, но я решил немного видоизменить его.
Возможно, вы не располагаете стеклянными банками, но у вас есть полиэтиленовые пакеты. Вы свободно можете использовать их как емкость для субстрата — фактически они имеют преимущество перед банками. Субстрат в пакетах проще перемещать, чем в стеклянной таре.
Другое преимущество пакетов состоит в лучшем снабжении субстрата кислородом. Так же процесс стерилизации в пакетах идет быстрее.
С другой стороны, полиэтилен пакета не съедобен для гриба (пакет можно вымыть после окончания роста гриба и снова использовать). Пакеты могут получить крошечные отверстия незаметные невооруженным глазом. Так же пакеты неудобны для отсыпания части субстрата (из банки проще вытряхнуть часть субстрата в контейнер).
Создание субстрата.
Вот мой рецепт приготовления шести пакетов с субстратом в течение 8 минут. Одного пакета субстрата достаточно для засева 20 литрового ведра, или примерно 3–4 килограмма сухого веса субстрата.
∙ 700 г. бумажных гранул (или другого материала не разрушающего перекись), совместимых с перекисью источника азота (варианты см. том 1)
∙ 6 г. гашеной извести (или 11,4 г. молотого известняка)
∙ 6 г. гипса.
∙ 990 мл. горячей воды из под крана.
∙ 110 мл. 3 % перекиси водорода.
1. Засыпьте гранулы в ведро и залейте их жидкими компонентами, перемешайте.
2. Добавьте оставшиеся компоненты и размешайте до распада шариков на отдельные опилки.
3. Разделите субстрат на порции примерно 250–300 г. и насыпьте в 6 полиэтиленовых пакетов.
4. Поместите пакеты в большую кастрюлю, налейте в нее воды до уровня примерно 10 см и закрепите горловины пакетов.
5. Закройте крышкой и кипятите примерно 8 минут.
6. Выньте пакеты из кастрюли и охладите их под струей воды, стараясь не намочить их содержимое.
7. Когда пакеты остынут, выньте их из воды и перевяжите горловины пакетов на расстоянии 3–4 см. от субстрата.
8. Когда пакеты полностью остынут, они будут готовы к засеву.
Использование субстрата.
Перед засевом мицелия в пакеты, его нужно размять на мелкие частицы. Позаботьтесь о том, чтобы не повредить оболочку пакета. Так же вы должны учитывать, что пакет выше уровня перевязки не стерилен. Поэтому для засева:
1. Оттяните верх пакета.
2. Раскройте пакет, касаясь только внешней поверхности пакета.
3. Откройте поверхность субстрата слегка вывернув горловину пакета.
Подготовка больших количеств субстрата
Первый субстрат.
Приготовление соломы с перекисью при комнатной температуре.
Этот метод привлекателен как для домашнего приготовления, так и для
